Articles

metoda pro indukovatelnou genovou over-exprese a down-regulace v rozvíjejících se modelu druhů pomocí Pogostick

Netradiční model druhy potřebují nové nástroje pro funkční testování genů, oba zachovány a lineage-specific geny. Tyto nástroje by měly umožnit zkoumání genové funkce, a to buď prostřednictvím knock-downs endogenních genů nebo přes over-exprese a ektopické exprese transgenů. Vytvořili jsme nový vektor nazývá Pogostick, které mohou být použity k více než-express nebo down-regulaci genů v organismech přístupný klíčků-line transformaci do piggyBac transponovatelných prvků. Vektor v současné době využívá heat-shock promotor Hsp70 z Drosophila melanogaster řídit expresi transgenu a, jako takový, bude mít bezprostřední použitelnost pro organismy, které mohou správně interpretovat tento promotor sekvence. Tady jsme se představit hlavní rysy Pogostick a jak kandidátské geny mohou být vloženy do vektoru pro použití v buď over-exprese nebo down-regulace experimenty. Kromě toho testujeme také Pogostick u dvou druhů hmyzu, d. melanogaster a vznikajícího modelu butterfly Bicyclus anynana. Jsme-express fluorescenční protein DsRed během larvální a pupal fáze z D. melanogaster rozvoj, a down-regulaci DsRed v souladu constitutively vyjádření tohoto genu v očích. Pak jsme se vyzkoušet over-exprese Ultrabithorax (Ubx) v B. anynana, a získat sekvence lemující Pogostick genomické inzerce. Tento nový vektor umožní vznikajícím modelovým druhům vstoupit do oblasti funkční genetiky s několika překážkami.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.