Articles

o metodă pentru supraexprimarea genelor inductibile și reglarea descendentă la speciile model emergente folosind Pogostick

speciile model netradiționale au nevoie de noi instrumente pentru testarea funcțională a genelor, atât gene conservate, cât și gene specifice descendenței. Aceste instrumente ar trebui să permită explorarea funcției genetice, fie prin eliminarea genelor endogene, fie prin supraexprimarea și expresia ectopică a transgenelor. Am construit un nou vector numit Pogostick care poate fi folosit pentru a supraexprima sau a regla în jos genele din organismele supuse transformării liniei germinale de către elementul transpozabil piggyBac. Vectorul folosește în prezent promotorul de șoc termic Hsp70 de la Drosophila melanogaster pentru a conduce expresia transgenă și, ca atare, va avea aplicabilitate imediată organismelor care pot interpreta corect această secvență promotor. Aici introducem principalele caracteristici ale Pogostick și modul în care genele candidate pot fi inserate în vector pentru a fi utilizate fie în experimente de supraexprimare, fie în experimente de reglare în jos. În plus, testăm și Pogostick la două specii de insecte, D. melanogaster și modelul emergent butterfly Bicyclus anynana. Exprimăm excesiv proteina fluorescentă DsRed în timpul stadiilor larvare și pupale ale dezvoltării D. melanogaster și reglăm DsRed într-o linie care exprimă constitutiv această genă în ochi. Apoi testăm supraexprimarea Ultrabithoraxului (Ubx) în B. anynana și obținem secvențe care flancează inserțiile genomice Pogostick. Acest nou vector va permite speciilor model emergente să intre în domeniul geneticii funcționale cu puține obstacole.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.